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瓊脂糖凝膠電泳實驗中常用的核酸染料及毒性介紹

 更新時間:2022-06-23 點擊量:5751

在分子生物學中,電泳實驗是核酸的分離、純化及蛋白識別的有效方法,可以與凝膠成像系統(tǒng)配合使用,也可以單獨使用,具體根據實驗目的來選擇。瓊脂糖凝膠電泳是通過DNA片段在瓊脂糖介質電場中的電泳速率大小來判斷 DNA分子量的大小的實驗方法。




瓊脂糖凝膠中常用的染料有哪些?

1.溴化乙錠 :溴 化乙錠通常習慣簡稱“EB",是核酸染色及凝膠成像分析中普遍使用的染料。
EB染料屬于核酸分子嵌入型染色劑,且具有DNA誘導突變的作用。研究發(fā)現(xiàn),長期使用溴化乙錠或長期處在含溴化乙錠的實驗環(huán)境中,會對人體造成較大的傷害,甚至增加遺傳方面的致畸率 。所以在實驗室中,使用EB類染料時要做好全套防護,實驗后的廢液、耗材等也要嚴格管理,切勿隨意丟棄,以防對他人造成間接傷害。

2.吖啶橙染料:吖啶橙染料(Goldview)主要用于RNA 染色、熒光染色以及細胞凋亡實驗等,從理論上講雖然Goldview染料的毒性遠遠低于 EB,但是在實驗室也不可粗心大意。

3.GelGreen熒光染料與 Gelred核酸染料
GelRed 和GelGreen 都屬于熒光核酸染料,其中Biotium的*較大,在化學發(fā)光、凝膠成像、電泳等相關實驗中應用較為普遍。 由于Gelred和GelGreen的分子量較大,且具有特殊的油性分子,很難滲透細胞膜進入動物細胞內,所以這種染料相對較為安全,實驗后的廢棄物對周邊環(huán)境的危害性也較小,可放心使用。

4.SYBR Green染料 SYBR Gold染料
SYBR Green與SYBR Gold具有靈敏度好,成本低廉,毒性低,信噪比較高,并且實驗時無需進行洗脫操作等特點,廣泛應用于凝膠電泳分析實驗中。但是作為花箐素類核酸染料其穩(wěn)定性較差,在一定光誘導下也會產生強誘變力,易造成DNA序列上的基因位點突變。


常用的這幾種核酸染料相信每個實驗室都使用過,但是對于核酸染料的危害也要注意,實驗中做好實驗防護也很關鍵。


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