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ApaLI內(nèi)切酶-分子生物學(xué)試劑

描述:ApaLI內(nèi)切酶(ApaLI restriction enzyme)是一種常用的限制性內(nèi)切酶,屬于Ⅱ型內(nèi)切酶家族。ApaLI內(nèi)切酶能夠識別并切割DNA中特定的核苷酸序列,具有特定的切割位置和特異性。LightNing® 快速內(nèi)切酶是一系列經(jīng)過基因工程重組的快速限制性內(nèi)切酶,適用于質(zhì)粒 DNA、PCR 產(chǎn)物或基因組 DNA 等的快速酶切。

更新時間:2025-03-06
產(chǎn)品型號:
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
詳情介紹

ApaLI內(nèi)切酶

ApaLI內(nèi)切酶-分子生物學(xué)試劑


ApaLI內(nèi)切酶(ApaLI restriction enzyme)是一種常用的限制性內(nèi)切酶,屬于Ⅱ型內(nèi)切酶家族。ApaLI內(nèi)切酶能夠識別并切割DNA中特定的核苷酸序列,具有特定的切割位置和特異性。本文將對ApaLI內(nèi)切酶的基本特性、作用機(jī)制、應(yīng)用領(lǐng)域等方面進(jìn)行詳細(xì)介紹。

ApaLI內(nèi)切酶 的基本特性:

ApaLI內(nèi)切酶主要識別并切割DNA中的5'-GTGCAC-3'序列,切位為該序列的ApaLI酶切位點(diǎn)。該酶切位點(diǎn)的特異性使ApaLI內(nèi)切酶在DNA分子中具有高度特異性,能夠精確切割含有特定序列的DNA片段。ApaLI內(nèi)切酶的活性受到環(huán)境因素(如pH值、離子濃度等)的影響,因此在實(shí)驗(yàn)操作中需要注意調(diào)節(jié)適宜的反應(yīng)條件。

ApaLI內(nèi)切酶的作用機(jī)制:

ApaLI內(nèi)切酶是一種雙鏈DNA內(nèi)切酶,通過識別特定的核苷酸序列,在該序列的特定位置引發(fā)DNA鏈的切割反應(yīng)。ApaLI內(nèi)切酶在酶切位點(diǎn)周圍與DNA分子形成復(fù)合物,通過水解作用將DNA鏈切斷,產(chǎn)生兩個具有粘性末端的DNA片段。這些粘性末端可用于DNA片段的連接、重組等進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)操作。

ApaLI內(nèi)切酶的應(yīng)用領(lǐng)域:

ApaLI內(nèi)切酶在分子生物學(xué)領(lǐng)域廣泛應(yīng)用于DNA片段的切割、重組、連接等實(shí)驗(yàn)操作中。通過ApaLI內(nèi)切酶的作用,可以在DNA分子中特異性地切割出含有目標(biāo)序列的片段,進(jìn)而進(jìn)行進(jìn)一步的DNA克隆、測序、PCR等實(shí)驗(yàn)操作。ApaLI內(nèi)切酶還常用于構(gòu)建重組質(zhì)粒、定向基因突變等研究領(lǐng)域,為研究人員提供了強(qiáng)大的工具和手段。


LightNing® 快速內(nèi)切酶是一系列經(jīng)過基因工程重組的快速限制性內(nèi)切酶,適用于質(zhì)粒 DNA、PCR 產(chǎn)物或基因組 DNA 等的快速酶切。所有 LightNing® 快速內(nèi)切酶在通用的 CutOne® 或 CutOne® Color Buffer 中都具有優(yōu)良的活性,能夠在 5~15 分鐘內(nèi)完成酶切。此外,百時美去磷酸化、連接試劑在 CutOne® Buffer 中均具有 100% 活性,支持一管化反應(yīng),提升“酶切 - 修飾 - 連接"的體驗(yàn)。

CutOne® Color Buffer包括紅色和黃色示蹤染料,可將產(chǎn)物直接用于凝膠電泳。CutOne® Color Buffer 的紅色染料與 2500 bp 雙鏈 DNA 片段在 1% 瓊脂糖凝膠中遷移速率接近;黃色染料與 10 bp 雙鏈 DNA 片段在 1% 瓊脂糖凝膠中遷移速率接近。

特性和用法

ApaLI 內(nèi)切酶可以快速內(nèi)切酶,可在5~15 min內(nèi)完成反應(yīng)


建議反應(yīng)條件

1× CutOne®緩沖液;

37℃溫育;

參照“DNA 快速酶切流程"配制反應(yīng)體系。


失活條件

80℃溫育20 min。


甲基化敏感性

對于被 CpG 甲基化的 DNA,剪切可能受阻,對于被 EcoKI 甲基化的 DNA,剪切可能受阻。

產(chǎn)品組成

組分

規(guī)格

LightNing® ApaLI

200 μl

10× CutOne® Buffer

2×1 ml

10× CutOne® Color Buffer

2×1 ml


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