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胎牛血清的保存方法

胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)常用的生物試劑，那么用不完的胎牛血清FBS該如何儲(chǔ)存呢？胎牛血清FBS一般需要冷凍保存，在-5到-20°C之間，并且可以在2到8°C的溫度下解凍。將血清等分并冷凍在較小的部分（通常為50ml試管）中通常很有用，以避免多次冷凍和解凍循環(huán)。有時(shí)，一些FBS等分試樣在冷凍溫度下仍保留在液體中。這是由于缺乏用于開始結(jié)晶（冷凍）的成核中心（顆粒物質(zhì)）。如果您只是用手指輕彈管子，它們通常幾乎會(huì)立即凝固。解凍后有一些沉淀是很常見的。沉淀物，可能是由于某些血清蛋白的變性，可...

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胎牛血清選購的冷知識(shí)

胎牛血清(FBS)是來自胎牛的凝結(jié)血液的液體部分，不含細(xì)胞、纖維蛋白和凝血因子，但含有大量對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)至關(guān)重要的營(yíng)養(yǎng)和大分子因子。牛血清白蛋白是FBS的主要成分。FBS中的生長(zhǎng)因子對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞的維持和生長(zhǎng)至關(guān)重要。FBS還含有多種小分子，如氨基酸、糖、脂質(zhì)和激素。FBS應(yīng)用廣泛。FBS的主要用途之一是在真核細(xì)胞培養(yǎng)中，其濃度高達(dá)20%甚至更高，它提供許多促進(jìn)細(xì)胞存活和增殖的必需營(yíng)養(yǎng)素和生長(zhǎng)因子。然而，需要注意的是，人類細(xì)胞培養(yǎng)物中的FBS可能會(huì)引入研究成果。用人類血清培養(yǎng)的人類...

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關(guān)于SDS-PAGE凝膠電泳的常見問答

電泳是分離蛋白質(zhì)和其他物質(zhì)如核酸、嘌呤、嘧啶、一些有機(jī)化合物甚至無機(jī)離子的主要技術(shù)。目前的大部分電泳是將樣品分離到固定介質(zhì)中的流動(dòng)相中。聚丙烯酰胺凝膠是主要介質(zhì)之一。它是一種多孔凝膠，其孔徑接近蛋白質(zhì)分子的大小，提高了蛋白質(zhì)的分辨率。此外，聚丙烯酰胺凝膠化學(xué)穩(wěn)定性好，重復(fù)性強(qiáng)，對(duì)pH和溫度變化穩(wěn)定，顏色觀察容易。SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）在蛋白質(zhì)分子量測(cè)定、特異性蛋白質(zhì)檢測(cè)、菌種鑒定等方面具有操作簡(jiǎn)單、重現(xiàn)性好等特點(diǎn)，因此廣為使用。電泳SDS-PAGE的工作...

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Western Blot實(shí)驗(yàn)步驟

本文摘要蛋白質(zhì)印跡技術(shù)（免疫印跡實(shí)驗(yàn)）又稱為WesternBlot。它是分子生物學(xué)、生物化學(xué)和免疫遺傳學(xué)中常用的一種實(shí)驗(yàn)方法。WesternBlot主要用于檢測(cè)或分析蛋白，應(yīng)用領(lǐng)域集中在基因表達(dá)研究、抗體活性檢測(cè)和疾病診斷等。01蛋白質(zhì)印跡基本流程圖02westernblot步驟樣品準(zhǔn)備：Tanon連續(xù)梯度預(yù)制膠（4-20%10孔/15孔/17孔）；（4-12%10孔/15孔/17孔）TanonMops/MES電泳緩沖液（粉劑）Tanon預(yù)染蛋白MarkerTanon4×LD...

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熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)中CT值出現(xiàn)異常的原因分析

熒光定量PCR是生物醫(yī)學(xué)中常用的檢測(cè)核酸病毒的方法之一，由此，這幾年P(guān)CR儀也成了近幾年臨床檢測(cè)和分子生物學(xué)研究的主要實(shí)驗(yàn)室設(shè)備。我們知道CT值是PCR擴(kuò)增曲線中的重要參數(shù)，那么CT值是什么？它與PCR擴(kuò)增存在什么關(guān)系？為什么有的時(shí)候基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)中會(huì)出現(xiàn)CT值異常甚至缺少CT值的情況？什么是CT值？在熒光定量PCR擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)中，當(dāng)擴(kuò)增產(chǎn)物的熒光信號(hào)（Fluorescencesignal）達(dá)到設(shè)定的熒光閾值（FLUORESCENCEthreshold）時(shí)的所對(duì)應(yīng)的擴(kuò)增循環(huán)數(shù)（Cy...

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