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臺(tái)盼藍(lán)染色細(xì)胞計(jì)數(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟和方法

細(xì)胞計(jì)數(shù)是確定培養(yǎng)中鋪板的細(xì)胞濃度、確定細(xì)胞活力和評估細(xì)胞分離程序結(jié)果的一個(gè)組成部分。建議在細(xì)胞分離之前進(jìn)行初始細(xì)胞計(jì)數(shù)；然后可以將該數(shù)字與細(xì)胞分離后的細(xì)胞計(jì)數(shù)進(jìn)行比較，以計(jì)算細(xì)胞恢復(fù)率。此外，當(dāng)預(yù)期細(xì)胞活力可能會(huì)降低時(shí)，應(yīng)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)，例如，在處理冷凍保存的細(xì)胞或離體操作的細(xì)胞時(shí)?？梢允褂门_(tái)盼藍(lán)或3%乙酸和亞甲藍(lán)進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù).進(jìn)行總有核細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)，建議使用3%乙酸和亞-CH3藍(lán)。乙酸溶解細(xì)胞膜，亞甲藍(lán)染色暴露的細(xì)胞核。由于成熟的紅細(xì)胞缺乏細(xì)胞核，因此在計(jì)數(shù)時(shí)被排除在外。或...

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胎牛血清的保存方法

胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)常用的生物試劑，那么用不完的胎牛血清FBS該如何儲(chǔ)存呢？胎牛血清FBS一般需要冷凍保存，在-5到-20°C之間，并且可以在2到8°C的溫度下解凍。將血清等分并冷凍在較小的部分（通常為50ml試管）中通常很有用，以避免多次冷凍和解凍循環(huán)。有時(shí)，一些FBS等分試樣在冷凍溫度下仍保留在液體中。這是由于缺乏用于開始結(jié)晶（冷凍）的成核中心（顆粒物質(zhì)）。如果您只是用手指輕彈管子，它們通常幾乎會(huì)立即凝固。解凍后有一些沉淀是很常見的。沉淀物，可能是由于某些血清蛋白的變性，可...

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胎牛血清選購的冷知識(shí)

胎牛血清(FBS)是來自胎牛的凝結(jié)血液的液體部分，不含細(xì)胞、纖維蛋白和凝血因子，但含有大量對細(xì)胞生長至關(guān)重要的營養(yǎng)和大分子因子。牛血清白蛋白是FBS的主要成分。FBS中的生長因子對于培養(yǎng)細(xì)胞的維持和生長至關(guān)重要。FBS還含有多種小分子，如氨基酸、糖、脂質(zhì)和激素。FBS應(yīng)用廣泛。FBS的主要用途之一是在真核細(xì)胞培養(yǎng)中，其濃度高達(dá)20%甚至更高，它提供許多促進(jìn)細(xì)胞存活和增殖的必需營養(yǎng)素和生長因子。然而，需要注意的是，人類細(xì)胞培養(yǎng)物中的FBS可能會(huì)引入研究成果。用人類血清培養(yǎng)的人類...

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關(guān)于SDS-PAGE凝膠電泳的常見問答

電泳是分離蛋白質(zhì)和其他物質(zhì)如核酸、嘌呤、嘧啶、一些有機(jī)化合物甚至無機(jī)離子的主要技術(shù)。目前的大部分電泳是將樣品分離到固定介質(zhì)中的流動(dòng)相中。聚丙烯酰胺凝膠是主要介質(zhì)之一。它是一種多孔凝膠，其孔徑接近蛋白質(zhì)分子的大小，提高了蛋白質(zhì)的分辨率。此外，聚丙烯酰胺凝膠化學(xué)穩(wěn)定性好，重復(fù)性強(qiáng)，對pH和溫度變化穩(wěn)定，顏色觀察容易。SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）在蛋白質(zhì)分子量測定、特異性蛋白質(zhì)檢測、菌種鑒定等方面具有操作簡單、重現(xiàn)性好等特點(diǎn)，因此廣為使用。電泳SDS-PAGE的工作...

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Western Blot實(shí)驗(yàn)步驟

本文摘要蛋白質(zhì)印跡技術(shù)（免疫印跡實(shí)驗(yàn)）又稱為WesternBlot。它是分子生物學(xué)、生物化學(xué)和免疫遺傳學(xué)中常用的一種實(shí)驗(yàn)方法。WesternBlot主要用于檢測或分析蛋白，應(yīng)用領(lǐng)域集中在基因表達(dá)研究、抗體活性檢測和疾病診斷等。01蛋白質(zhì)印跡基本流程圖02westernblot步驟樣品準(zhǔn)備：Tanon連續(xù)梯度預(yù)制膠（4-20%10孔/15孔/17孔）；（4-12%10孔/15孔/17孔）TanonMops/MES電泳緩沖液（粉劑）Tanon預(yù)染蛋白MarkerTanon4×LD...

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