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熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)中CT值出現(xiàn)異常的原因分析

熒光定量PCR是生物醫(yī)學(xué)中常用的檢測(cè)核酸病毒的方法之一，由此，這幾年P(guān)CR儀也成了近幾年臨床檢測(cè)和分子生物學(xué)研究的主要實(shí)驗(yàn)室設(shè)備。我們知道CT值是PCR擴(kuò)增曲線中的重要參數(shù)，那么CT值是什么？它與PCR擴(kuò)增存在什么關(guān)系？為什么有的時(shí)候基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)中會(huì)出現(xiàn)CT值異常甚至缺少CT值的情況？什么是CT值？在熒光定量PCR擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)中，當(dāng)擴(kuò)增產(chǎn)物的熒光信號(hào)（Fluorescencesignal）達(dá)到設(shè)定的熒光閾值（FLUORESCENCEthreshold）時(shí)的所對(duì)應(yīng)的擴(kuò)增循環(huán)數(shù)（Cy...

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細(xì)胞培養(yǎng)中常見(jiàn)的問(wèn)題解答

標(biāo)簽：細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)液氮培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)是生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)中的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)，在細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中，很多因素都會(huì)造成細(xì)胞生長(zhǎng)不良。下面簡(jiǎn)單歸納一下細(xì)胞生長(zhǎng)不良的原因及對(duì)應(yīng)的解決方案。常見(jiàn)問(wèn)題一：為什么細(xì)胞解凍后缺少活力，活細(xì)胞占比較低？這種現(xiàn)象可能主要由以下幾種原因所導(dǎo)致：1.培養(yǎng)物凍存液等質(zhì)量欠缺。解決方案：a.確保用來(lái)制備儲(chǔ)存物（凍存液）的起始培養(yǎng)物需要保證其健康、無(wú)微生物污染、處于生長(zhǎng)對(duì)數(shù)期后期狀態(tài)。b.收獲細(xì)胞時(shí)需要小心翼翼，避免細(xì)胞損傷。2.儲(chǔ)存物凍存方法不當(dāng)解決方案：a.在液氮冷凍...

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真空離心濃縮儀的原理和應(yīng)用

溶劑去除是制藥、化學(xué)和生物技術(shù)行業(yè)廣泛應(yīng)用中的過(guò)程。盡管使用了多種樣品形式和溶劑，但沒(méi)有一種單一的溶劑去除技術(shù)可以提供通用的解決方案。隨著冷凍干燥和離心濃縮技術(shù)的不斷成熟，結(jié)合真空泵、冷阱和加熱蒸發(fā)設(shè)備，所開(kāi)發(fā)的新一代高功率冷阱、真空離心濃縮儀等儀器，既提高了蒸發(fā)性能又改善了樣品完整度，這類(lèi)儀器還進(jìn)一步地提升了溶劑回收率，從而減少了蒸發(fā)-濃縮過(guò)程對(duì)環(huán)境的影響。只有充分了解離心濃縮儀的基本原理與應(yīng)用才能更好地在實(shí)驗(yàn)中發(fā)揮它的作用。溶劑去除的原理在溶劑去除過(guò)程中，以熱量的形式施加...

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細(xì)胞周期檢查點(diǎn)及其調(diào)節(jié)機(jī)制

細(xì)胞周期檢查點(diǎn)：§細(xì)胞通常在體積翻倍時(shí)進(jìn)行分裂，但實(shí)際上細(xì)胞分裂過(guò)程的控制非常復(fù)雜且精確。細(xì)胞分裂的所有過(guò)程或步驟都是按順序發(fā)生的，并且細(xì)胞知道何時(shí)進(jìn)行以及何時(shí)等待和停止細(xì)胞分裂。稱(chēng)為細(xì)胞周期?！煸贒NA復(fù)制完成之前或當(dāng)染色體或紡錘體纖維受損時(shí)，連續(xù)的細(xì)胞分裂會(huì)給細(xì)胞甚至有機(jī)體帶來(lái)災(zāi)難性的后果。因此，在進(jìn)行細(xì)胞分裂之前，細(xì)胞的各個(gè)方面都要通過(guò)其內(nèi)部機(jī)制進(jìn)行檢查。§檢查點(diǎn)是真核細(xì)胞周期中的幾個(gè)點(diǎn)之一，在這些點(diǎn)上，可以停止細(xì)胞向細(xì)胞周期下一階段的進(jìn)程，直到條件有利?！煸谘h(huán)期間會(huì)...

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Southern Blot原理和實(shí)驗(yàn)步驟

SouthernBlot印跡定義：涉及將凝膠上分離的特定DNA、RNA或蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到載體膜上以進(jìn)行檢測(cè)或鑒定的分析技術(shù)稱(chēng)為印跡。變性片段從凝膠中轉(zhuǎn)移到載體膜上的過(guò)程使其易于使用探針或抗體進(jìn)行分析。根據(jù)要分離的物質(zhì)，印跡技術(shù)可能是——Southern印跡、Northern印跡或Western印跡，它們分別分離DNA、RNA和蛋白質(zhì)。SouthernBlot是一種用于分子生物學(xué)、免疫遺傳學(xué)和其他分子方法的分析技術(shù)，用于從DNA樣品的混合物或DNA鏈中的特定堿基序列中檢測(cè)或鑒定感興...

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