技術(shù)文章
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技術(shù)文章
2023-216
當您聽到“克隆”一詞時,您可能會想到克隆整個生物體,例如綿羊多利。然而,克隆某物的全部意思就是制作它的基因精確副本。在分子生物學實驗室中,常被克隆的是基因或其他小片段DNA稱為DNA克隆。DNA克隆技術(shù)概述DNA克隆技術(shù)其實就是基因編輯,是指制作特定DNA片段的多個相同副本的過程。在典型的DNA克隆過程中,通常會將目的的基因或其他DNA片段插入稱為質(zhì)粒的環(huán)狀DNA片段中。插入是使用“剪切和粘貼”DNA的酶完成的,它會產(chǎn)生一個重組DNA分子,或由多個來源的片段組裝而成的DNA。...
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2023-215
實驗室移液槍、實驗室天平、PH計等實驗室儀器使用一段時間后,需要對其進行校準,那么實驗室儀器可以自校準嗎?小編帶你了解一下:內(nèi)部校準與自校準的區(qū)別“自校準”一般是利用測量設(shè)備自帶的校準程序或功能(比如智能儀器的開機自校準程序)或設(shè)備廠商提供的沒有溯源證書的標準樣品進行的校準活動,通常情況下,其不是有效的量值溯源活動,但特殊領(lǐng)域另有規(guī)定除外。“內(nèi)部校準”是指在實驗室或其所在組織內(nèi)部實施的,使用自有的設(shè)施和測量標準,校準結(jié)果僅用于內(nèi)部需要,為實現(xiàn)獲認可的檢測活動相關(guān)的測量設(shè)備的量...
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2023-215
DNA重組技術(shù),是分子的生物學研究生需要掌握的實驗技術(shù)之一,DNA重組實驗方法總結(jié)如下:一、實驗目的體外連接獲得重組分子,用于轉(zhuǎn)化受體細胞。二、實驗原理DNA重組技術(shù)是用內(nèi)切酶分別將載體和外源DNA切開,經(jīng)分離純化后,用連接酶將其連接,構(gòu)成新的DNA分子。外源DNA片段和質(zhì)粒載體的連接反應策略有以下幾種:1、帶有非互補突出端的片段用兩種不同的限制性內(nèi)切酶進行消化可以產(chǎn)生帶有非互補的粘性末端,這也是最容易克隆的DNA片段,一般情況下,常用質(zhì)粒載體均帶有多個不同限制酶的識別序列組...
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2023-215
PCR儀使用參數(shù)設(shè)定注意事項PCR儀使用參數(shù)設(shè)定不正確會影響到PCR實驗結(jié)果,這主要表現(xiàn)在溫度、時間和循環(huán)次數(shù)上,如果溫度參數(shù)設(shè)置過高,延伸時間不夠都會對實驗結(jié)果造成影響,下面談談使用PCR儀參數(shù)設(shè)定時的注意事項:一、溫度和時間溫度與時間的設(shè)置:基于PCR原理三步驟而設(shè)置變性-退火-延伸三個溫度點。在標準反應中采用三溫度點法,雙鏈DNA在90~95℃變性,再迅速冷卻至40~60℃,引物退火并結(jié)合到靶序列上,然后快速升溫至70~75℃,在TaqDNA聚合酶的作用下,使引物鏈沿模...
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2023-215
丙酮酸羧化酶是細胞質(zhì)和線粒體代謝途徑的重要元素,可以有效促進能量代謝。在CHO細胞中過表達酵母胞質(zhì)丙酮酸羧化酶(PYC2),可以增加丙酮酸流向TCA循環(huán)。增強的PYC2表達導致丙酮酸通量增加,從而使乳酸積累減少多達4倍,并顯著增加細胞密度和培養(yǎng)壽命。有了這個結(jié)果,與親本細胞相比,工程細胞的抗體表達顯著提高了70%,產(chǎn)品質(zhì)量也有所提高(約3倍)。通過PYC2工程改造提升細胞性能,在丙酮酸、葡萄糖、乳酸和細胞能量代謝方面具有均高于親代細胞的各種優(yōu)勢。PYC2工程改造原理和方法在補...
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